IL-37融合EGFP真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达
刘倩
梁庄严
何素辉
王森
陈章权
1.523808 东莞市，广东省医学分子诊断重点实验室，广东医学院医学检验学院2.523808 东莞市，广东省医学分子诊断重点实验室，广东医学院医学检验学院3.523808 东莞市，广东省医学分子诊断重点实验室，广东医学院医学检验学院4.523808 东莞市，广东省医学分子诊断重点实验室，广东医学院医学检验学院5.523808 东莞市，广东省医学分子诊断重点实验室，广东医学院医学检验学院
摘要：目的：构建白介素－37（interleukin-37，IL-37）与增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein， EGFP）融合基因真核表达载体，并检测其在293T细胞中的表达。方法：通过PCR分别扩增出IL-37和EGFP基因，经酶切和测序鉴定正确后，克隆入真核表达载体 pcDNA3．1，用 Linker（G4S）3连接2个目的基因片段，构建 IL-37-GFP 融合基因真核表达质粒 pcDNA3．1／IL-37-EGFP，将其转染到293T 细胞中，观察荧光产生情况，用实时荧光定量RT-PCR和Western blot检测IL-37的表达情况。结果：经酶切和测序鉴定，由linker连接的IL-37-GFP 融合基因正确克隆入表达载体pcDNA3．1，重组表达质粒 pcDNA3．1／IL-37-EGFP转染293T 细胞后，用荧光显微镜检测显示荧光蛋白在细胞中表达，RT-PCR 与 Western blot 均检测到高水平IL-37 mRNA 和IL-37蛋白的表达。结论：成功构建了IL-37-融合报告基因 EGFP 的真核表达载体，并在293T细胞中得到了有效表达，为进一步研究IL-37的功能和表达调控奠定了实验基础。
关键词：白介素-37绿色荧光蛋白表达载体293T细胞
资助基金：国家自然科学基金(81302244)广东省大学生创新创业训练计划(1057113038)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1399-1402,1403 )
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