携人胰岛素基因的“可控”型腺病毒载体的构建与初步验证
杨丽斌1
斯朗扎西2
李元朝3
何威3
王儒鹏3
周春丽3
张斌3
1.830049,乌鲁木齐市友谊医院内分泌科2.856000 西藏山南，中国人民解放军77563部队61分队3.中国人民解放军第三军医大学附属新桥医院皮肤风湿免疫科, 重庆市,400037
摘要：目的：设计并构建一种“可控”型腺病毒载体，该腺病毒载体在加入诱导剂后能自行消亡，从而解决其激发宿主免疫及产生复制型腺病毒等问题，为临床提供一种更安全的外源基因载体。方法：以传统AdEasyTM腺病毒载体系统为基础，将Cre-LoxP定点敲除系统的Cre酶基因安置在Tet-On诱导表达系统的下游，而在穿梭质粒右臂基因组上下游分别插入一个LoxP位点，构建成“可控”型腺病毒穿梭质粒，并插入全长人胰岛素基因，感染大鼠骨髓间充质干细胞，观察诱导剂加入前后细胞荧光蛋白表达及人胰岛素分泌情况。结果：成功构建携全长人胰岛素基因的“可控”型重组腺病毒AdEasyN／INS，转染QBI-293A细胞和大鼠骨髓间充质干细胞后，均可观察到绿色荧光的表达，在加入诱导剂Dox后，荧光细胞数／总细胞数的比值及胰岛素水平均显著降低。结论：成功构建了携带人胰岛素全长基因的新型“可控”型腺病毒载体，该新型重组腺病毒可像传统载体一样感染BMCs，且能加入诱导剂后迅速降解，实现了外源基因载体的可控性。
关键词：“可控”型腺病毒载体人胰岛素降解
资助基金：国家自然科学基金(31000455)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1744-1747 )
英文信息