人血管内皮生长因子基因修饰的肌源性干细胞的构建及表达
安庚1
康祥锦1
张文1
张金明2
1.510150,广州医科大学附属第三医院生殖医学中心2.中山大学孙逸仙纪念医院, 广州市,510120
摘要：目的：构建携带人血管内皮生长因子基因（VEGF）的慢病毒载体，转染肌源性干细胞（MDSCs）并检测VEGF的表达。方法：体外培养兔肌源性干细胞，细胞免疫荧光检测MDSCs 的CD34、CD45、Bcl-2和Desmin表达。构建pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP-VEGF慢病毒载体，双酶切及测序鉴定。转染MDSCs ，流式细胞仪（FCM）检测转染率。Real-time PCR，Western blot及ELISA检测VEGF在MDSCs的表达情况。结果：测序结果显示成功构建pCDH--VEGF慢病毒载体。FCM检测各组MDSCs的转染率，MOI值分别为1、5、15时转染率分别达到16．7％、45．6％、66．3％和85．6％。 MOI值为20时，更达到90．1％。 Real-time PCR，Western blot及ELISA均显示VEGF在MDSCs 内稳定表达。结论：成功构建携带VEGF的慢病毒载体，转染 MDSCs并稳定表达。
关键词：慢病毒载体血管内皮生长因子肌源性干细胞转染
资助基金：国家自然科学基金(81401191)广东省自然科学基金(S2013040014056)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 2954-2956 )
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