霍乱疫苗株溶血素hlyA基因敲除及绿色荧光蛋白构建
杨秋1
周妍妍1
阚飙2
芮勇宇1
1.南方医科大学南方医院检验医学科, 广州市,5105152.中国疾病预防控制中心传染病预防控制所, 北京市,100226
摘要：目的：探讨霍乱疫苗株 NFYY101溶血素 hlyA 基因敲除及绿色荧光蛋白的构建。方法：将 hlyA基因上游片段（hlyAup）、hlyA 下游片段（hlyAdown），克隆入 pUC18中，再在两者间插入绿色荧光蛋白（lacz-GFPuv ）基因，获得重组质粒 pUC18-hlyAup-laczGFPuv-hlyAdown ，再构建重组自杀质粒 pCVD442-hlyAup-laczGFPuv-hlyAdown ，接合入霍乱疫苗株 NFYY101中，进行同源重组。结果：正确构建重组自杀质粒pCVD442-hlyAup-laczGFPuv-hlyAdown 表达绿色荧光蛋白，成功缺失了疫苗株候选株 NFYY101的 hlyA 基因，在敲除位置同源重组入绿色荧光蛋白基因并表达。结论：成功构建表达绿色荧光蛋白的重组自杀质粒，可用于O1群及O139群霍乱疫苗株hlyA基因敲除及绿色荧光蛋白构建。
关键词：霍乱弧菌减毒活疫苗基因重组绿色荧光蛋白
资助基金：广州市科技计划(201510010167)广东省科技计划(2014A010107011)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 362-366 )
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