VDR和GLi1在前列腺癌细胞PC-3中的表达及其相关性
张远东
赵晖
申吉泓
刘孝东
李康健
官润云
1.650032,昆明医科大学第一附属医院泌尿外科2.650032,昆明医科大学第一附属医院泌尿外科3.650032,昆明医科大学第一附属医院泌尿外科4.650032,昆明医科大学第一附属医院泌尿外科5.650032,昆明医科大学第一附属医院泌尿外科6.650032,昆明医科大学第一附属医院泌尿外科
摘要：目的 初步探讨慢病毒携带shRNA-VDR载体干扰前列腺癌PC-3细胞中VDR基因对GLi1的影响.方法 依照PC-3细胞的培养条件培养细胞;采用荧光定量PCR法和免疫细胞化学SP法检测PC-3细胞中VDR、GLi1两个基因表达情况;对PC-3细胞病毒侵染进行效率评价;运用RT-PCR法检测PC-3细胞VDR基因干扰效果及Gli1转录水平改变情况.结果 细胞培养:拍照记录细胞状态:PC-3细胞生长状态良好,以4 d为1周期进行传代;荧光定量PCR法和免疫细胞化学SP法显示VDR、GLi1均在PC-3细胞中表达;慢病毒侵染效率显示为按照1:10的比例向PC-3细胞加入LV3-NC慢病毒时,细胞侵染效率最好,约为95%左右;RT-PCR显示:VDR-shRNA慢病毒成功干扰VDR表达,在VDR-shRNA慢病毒转染72 h后与对照组相比实验组VDR基因转录水平下降85%(P<0.05),同时实验组GLi1基因转录水平与对照组相比上升9%(P<0.05);而当转染96 h后实验组VDR基因转录水平与对照组相比下降99%(沉默),同时实验组GLi1基因转录水平与对照组相比上升248%(P<0.05).结论 所培养的PC-3细胞状态较好;VDR和GLi1基因在PC-3细胞中均表达;慢病毒按照1:10的比例侵染PC-3效率最高;当VDR被干扰后GLi1表达增高,因而在前列腺癌细胞中维生素D可抑制Hh信号通路可致GLi1表达下调.
关键词：PC-3细胞维生素D受体(VDR)GLi1蛋白基因干扰
资助基金：云南省应用基础研究(昆医联合专项基金)(2017FE467-042)云南省应用基础研究(昆医联合专项基金)(2014FB013)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 3530-3534 )
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