竹节香附素A对肠癌HT29细胞凋亡及周期的影响
孟春芹1
王瑞平2
1.南京中医药大学附属医院, 南京市,2100292.江苏省中医院肿瘤科,南京市,210029
摘要：目的 观察竹节香附素A(RA)对人结肠癌HT29细胞凋亡及周期的影响,并探讨其相关机制.方法1,2,4,8,16 μmol/L的RA分别作用细胞12、24、48 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测RA对HT29细胞的增殖抑制作用,计算半数抑制浓度IC50;荧光显微镜下观察Hoechst33258染色,RA对细胞凋亡形态学的影响;流式细胞术(FCM)检测RA对HT29细胞凋亡及细胞周期的影响;蛋白质印迹法(Western blot,WB)检测Cleaved-caspase-3、Cleaved-PARP、CyclinB、CDK1等蛋白的表达情况.结果 竹节香附素A能够抑制HT29细胞的增殖,并与浓度、时间呈正相关(P<0.05),12、24、48 h IC50分别为为(9.31 ± 0.63) μmol/L,(4.88 ± 1.02)μmol/L,(3.60 ± 0.89)μmol/L.Hochest33258染色发现细胞出现核固缩、核碎裂;流式细胞术显示:随着给药浓度的增大凋亡率逐渐增加(P<0.05);Western blot(WB)结果显示Cleaved-caspase-3、Cleaved-PARP蛋白表达增加.竹节香附素A作用于HT29细胞后,与对照组相比,G2/M期细胞比例逐渐增高;且CyclinB、CDK1蛋白表达随着给药浓度的增大而减少.信号通路PI3K/AKT中PI3K、AKT蛋白表达上调,p-PI3K、p-AKT表达下调.结论 RA能够抑制肠癌HT29细胞的增殖,其机制可能是通过调控PI3K/AKT信号通路诱导细胞凋亡和阻滞细胞周期实现的.
关键词：竹节香附素AHT29细胞细胞凋亡细胞周期PI3K/AKT信号通路
资助基金：国家中医临床研究基地业务建设科研专项(JDZX2012087)江苏省中医药领军人才项目(LJ200908)江苏省卫生厅项目(BJ14013)江苏省普通高等学校研究生科研创新计划(KYLX16-1145)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3858-3863 )
英文信息