ATP7A对结肠癌细胞耐奥沙利铂的机制初探
余文燕1
王国娟2
许建华3
王桦影1
范忠泽3
1.江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心(江西省中医病因生物学重点实验室,No.JA009500) 南昌,3300042.江西中医药大学附属医院肿瘤科 南昌3300063.上海中医药大学附属普陀医院肿瘤科 上海200062
摘要：目的 探讨铜转运蛋白ATP7A对人结肠癌耐药细胞HCT116/L-OHP耐奥沙利铂的作用机制.方法 选用RNA沉默(siRNA)ATP7A稳转结肠癌耐药细胞siATP7A-HCT116/L-OHP,同时设立空转染组negATP7A-HCT116/L-OHP,以化疗药奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)作为用药组,分别采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、Annexin V-FITC/PI双染法及蛋白免疫印迹法检测ATP7A蛋白沉默前后对HCT116/L-OHP细胞抑制率、凋亡率及ATP7A蛋白表达的影响.结果 (1)随着L-OHP浓度的增加对细胞抑制率增强,IC50(μg/mL)由85.81±2.76降至41.30±3.31,逆转耐药2.07倍.(2)negATP7A-HCT116/L-OHP和siATP7A-HCT116/L-OHP细胞空白组48 h凋亡率分别为(1.4±0.1)％和(4.47±0.15)％,L-OHP组细胞凋亡率分别为(4.97±0.06)％和(25.87±0.21)％.与negATP7A-HCT116/L-OHP细胞相比,同一组别siATP7A-HCT116/L-OHP细胞凋亡率均显著升高(P<0.001).(3)与negATP7A-HCT116/L-OHP细胞L-OHP组相比,siATP7A-HCT116/L-OHP细胞L-OHP组内除CTR1蛋白上调外,ATP7A、ATP7B、ATOX1蛋白均呈不同程度的下调(P<0.001).结论 ATP7A降低结肠癌耐药细胞HCT116/L-OHP对L-OHP的敏感性及细胞凋亡,沉默后能上调铜转运相关蛋白CTR1的表达、下调ATP7B、ATOX1表达,可能是人结肠癌细胞耐奥沙利铂的重要机制之一.
关键词：ATP7A结肠癌奥沙利铂增殖凋亡
资助基金：江西省自然科学基金(20161BAB215208)江西省卫生计生委中医药科研项目(2015A047)江西省教育厅科技项目(GJJ150838)江西中医药大学校级项目(2014BS002)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 186-190 )
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