钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ RNA干扰载体构建及对破骨细胞分化和骨吸收的影响
王艺睿1
王会1
戚孟春1
董伟1
冯晓洁1
孙红2
1.华北理工大学口腔医学院口腔颌面外科教研室,河北唐山,0630002.华北理工大学基础医学院病理教研室,河北唐山,063000
摘要：目的 研究钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ (CaMKⅡγ) RNA干扰对破骨细胞分化和骨吸收的影响.方法 构建3个CaMKⅡγ RNA慢病毒重组干扰载体;阴性载体转染RAW264.7细胞, 确定最适转染滴度值 (MOI) 和转染效率.用重组载体转染细胞, 确定干扰效果最佳的重组载体用于后续实验.细胞分为对照组、阴性载体组、干扰载体组;病毒转染5 d后通过TRAP染色及牙本质磨片骨吸收陷窝检测3组破骨细胞生成及骨吸收情况.结果 成功构建了3个CaMKⅡγ重组干扰载体;最适MOI值为30, 转染效率>80％.#3重组载体干扰效果最佳, 干扰效率在mRNA及蛋白水平分别为78.16％和67.02％ (P <0.01) .3组细胞中, 干扰载体组多核破骨细胞数、牙本质吸收陷窝数和面积较对照组分别下降了59.99％、54.19％和57.94％ (P <0.01) , 而阴性载体组和对照组比较差异无显著性 (P> 0.05) .结论 CaMKⅡγ RNA干扰可显著抑制破骨细胞生成和骨吸收功能.
关键词：钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ破骨细胞RNA干扰慢病毒
资助基金：国家自然科学基金(81270965)河北省教育厅重点研究项目(ZD2015005)河北省自然科学基金(H2017209114)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 557-561 )
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