外泌体介导miR-519c-5p增强脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡作用
黄发1
吕嘉贤2
许静红1
姚纪友3
童荔2
胡晓光2
朱艳平2
曹璐2
蔡常洁2
1.中山大学附属第一医院 广州510080;广东省器官捐献与移植免疫重点实验室,广东省器官移植科技合作基地 广州5100802.中山大学附属第一医院 广州5100803.广州市第一人民医院 广州510000
摘要：目的 探讨外泌体介导的miR-519c-5p是否能增强脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡作用.方法 收集大量人脐带静脉内皮细胞(HUVECs)上清液,通过超速离心法制备大量外泌体(exosomes),制备大量无任何处理的blank-exosomes和过表达miR-519c-5p的miR-519c-5p-exosomes;同时予以LPS 10μg/mL刺激HUVECs 6 h构建脓毒症模型,再与分别与上述两种外泌体共培养12 h.实验设立3个组:HUVECs+blank-exosomes为空白组,HUVECs+LPS+blank-exosomes、HUVECs+miR-519c-5p-exosomes为对照组,HUVECs+LPS+miR-519c-5p-exosomes为实验组.通过qRT-PCR法检测miR-519c-5p在外泌体及HUVECs中的表达,通过CCK-8法与流式细胞术分别检测各组内皮细胞增殖和凋亡的情况.结果 经qRT-PCR验证转染的过表达exosomes较blank-exosomes与mimic NC-exosomes miR-519c-5p表达升高约13倍(P<0.001).同时,CCK-8测得实验组OD值均低于空白组和对照组(0.458 vs.1.388,0.458 vs.0.843,P<0.05),流式细胞术测得实验组细胞凋亡比例均高于空白组和对照组(7.197％vs.0.647％,P<0.001;7.197％vs.3.423％,P=0.001).结论 外泌体介导的miR-519c-5p能增强脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡作用.
关键词：外泌体脓毒症凋亡人脐带静脉内皮细胞miRNA
分类号：R319(医用一般科学)
资助基金：广州市科技计划(201704020153)广东省器官捐献与移植免疫重点实验室建设项目(2013A061401007)国家国际科技合作专项基金(2015B050501002)
论文发表日期：2020-03-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 722-728 )
英文信息