miR-365通过调控ATG3对HCC细胞自噬的作用机制
王丽红1
吴慧丽1
张利1
李宾1
刘迎2
1.郑州大学附属郑州中心医院消化内科 郑州4500002.郑州大学附属郑州中心医院门诊综合诊疗中心 郑州450000
摘要：目的 探讨微小RNA(miR)-365通过调控自噬相关基因3(ATG3)对肝细胞性肝癌(HCC)细胞自噬的影响.方法 收集HCC患者癌组织和癌旁组织,另购买人肝癌SMMC-7721细胞、肝癌HepG2细胞,人正常肝细胞L02,转染SMMC-7721细胞,随机分为对照组、NC组(转染miR-365-NC)和过表达组(转染miR-365 mimics).RT-qPCR检测患者不同组织及不同肝癌细胞系和正常肝细胞中miR-365和ATG3表达水平;MTT法检测转染后SMMC-7721细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;透射电镜及MDC染色观察细胞自噬情况;Western blot观察细胞中ATG3、自噬微管相关蛋白轻链3-II(LC3-II)、p62、Beclin1蛋白相对表达量;双荧光素酶实验检测miR-365与ATG3的靶向性.结果 HCC患者癌组织中miR-365、ATG3表达低于癌旁组织(P<0.05),肝癌SMMC-7721细胞、HepG2细胞中miR-365、ATG3表达低于正常肝细胞L02(P<0.05).转染miR-365后,与对照组和NC组比较,过表达组miR-365、ATG3表达升高,细胞增殖降低,凋亡率升高(P<0.05).过表达组透射电镜观察有自噬泡形成,MDC染色荧光强度增加.与对照组和NC组比较,过表达组ATG3、LC3-II、Beclin1蛋白表达增加,p62蛋白表达下降(P<0.05).双荧光素酶实验显示ATG3为miR-365的靶基因.结论 过表达miR-365可上调ATG3表达诱导细胞自噬,抑制SMMC-7721细胞增殖,促进细胞凋亡.
关键词：肝细胞性肝癌miR-365自噬自噬相关基因3
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：河南省医学科技攻关计划(2018020772)
论文发表日期：2020-12-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3211-3216 )
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