LncRNA HOTAIR通过调控miR-30d影响鼻咽癌细胞的侵袭和迁移
陈曦1
朱悦莹2
施典羽3
颜帅2
汤国栋3
邹宇2
1.广东省妇幼保健院耳鼻咽喉科,广州511400;深圳市龙华区人民医院耳鼻咽喉科,广东深圳5181092.广东省妇幼保健院耳鼻咽喉科,广州5114003.深圳市龙华区人民医院耳鼻咽喉科,广东深圳518109
摘要：目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)HOX转录本反义RNA(HOTAIR)通过调控靶向小分子RNA-30d(miR-30d)影响鼻咽癌细胞侵袭和迁移的机制.方法 在鼻咽癌CNE-2细胞中转染HOTAIR siRNA,使用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定转染效果,Transwell法测定肿瘤细胞侵袭及迁移能力,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达;生物信息学软件分析HOTAIR与miR-30d区域结合位点,利用双荧光素酶报告系统确定两者结合关系;用RT-qPCR方法 检测下调HOTAIR后鼻咽癌细胞中miR-30d表达的变化.将HOTAIR siRNA和miR-30d inhibitor共转染至CNE-2细胞中,用上述方法 分析细胞侵袭、迁移及E-cadherin、vimentin和GRP78蛋白表达的变化.结果 敲减HOTAIR表达后,CNE-2细胞的侵袭和迁移能力下降,细胞中vimentin和GRP78蛋白水平降低,E-cadherin蛋白水平升高;HOTAIR靶向调控miR-30d的表达,敲减HOTAIR的表达可以提高CNE-2细胞中miR-30d的水平,miR-30d inhibitor可以明显逆转敲减HOTAIR对CNE-2细胞侵袭、迁移能力以及E-cadherin、vimentin和GRP78蛋白表达的影响.结论 HOTAIR通过负调控miR-30d影响GRP78和上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达,有利于促进鼻咽癌细胞的侵袭和迁移.
关键词：长链非编码RNAHOTAIR小分子RNA-30d鼻咽癌细胞侵袭细胞迁移
分类号：R739.6(耳鼻咽喉肿瘤)
资助基金：深圳市科技计划(JCYJ20170307141944428)
论文发表日期：2021-02-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 314-318 )
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