大鼠Kruppel样因子14腺病毒载体的构建及其对心肌细胞肥大的影响
任志磊
杨崇哲
银孟卓
黄凯华
刘丰
1.广州医科大学附属广州市第一人民医院老年病科 广州5101802.广州医科大学附属广州市第一人民医院老年病科 广州5101803.广州医科大学附属广州市第一人民医院老年病科 广州5101804.广州医科大学附属广州市第一人民医院老年病科 广州5101805.广州医科大学附属广州市第一人民医院老年病科 广州510180
摘要:目的 检测生理状态和病理性肥大时大鼠乳鼠心肌细胞(NRVM)内Kruppel样因子14(KLF14)的表达水平.构建大鼠KLF14腺病毒载体,感染大鼠NRVM稳定高表达KLF14,探讨其对心肌细胞肥大的影响.方法 根据NCBI数据库KLF14的序列合成并构建pHBAd-MCMV-RFP-KLF14重组质粒,PCR和测序鉴定后通过大肠杆菌扩增,在HEK 293细胞中包装成KLF14腺病毒.用KLF14腺病毒或阴性对照红色荧光蛋白(RFP)腺病毒感染NRVM,使用异丙肾上腺素(ISO)刺激NRVM诱导心肌细胞肥大,RT-PCR检测BNP和KLF14的表达水平.结果 PCR和测序鉴定证实KLF14腺病毒质粒构建成功.RT-PCR检测感染KLF14腺病毒可以显著上调KLF14在NRVM中的表达,增加ISO上调的BNP的表达.结论 生理情况下,KLF14在心肌细胞中低丰度表达,病理性肥大时表达升高.KLF14过表达促进ISO诱导的心肌细胞肥大.
关键词:KLF14腺病毒载体心肌细胞肥大B型钠尿肽
分类号:R-33(实验医学、医学实验)
资助基金:国家自然科学基金(81300176)广东省自然科学基金(S2011040001711)
论文发表日期:2021-02-25
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 441-445 )
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