不同时长的过氧化氢刺激对人脐静脉内皮细胞衰老的影响
林朴卿
阮云军
南方医科大学南方医院老年病科 广州510515
摘要:目的 研究不同时长下200μmol/L过氧化氢(H2O2)刺激对人脐静脉内皮细胞(human umbil-ical vein endothelial cell,HUVEC)衰老的影响,为氧化应激诱导细胞衰老模型提供参考.方法 把HUVEC分为空白组和H2O2暴露组,暴露组分别在200μmol/L终浓度的H2O2作用0.5、1、3、6、12、24、48和96 h.噻唑蓝比色法(MTT)检测各组细胞活力;细胞衰老-β半糖苷酶染色(SA-β糖苷酶染色)检测细胞衰老情况;酶联吸附反应(enzyme linked immunoabsorbent assay,ELISA)测定各组细胞内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、一氧化氮(nitric oxide,NO)含量;比色法测定各组细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(super oxidase dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathionperoxidase,GSH-px)水平;Western Blot检测Bax、Bcl-2、p21蛋白的表达情况.结果 与空白组相比,H2O2暴露组短时间内(3 h以内)细胞增殖活性增高,少量细胞SA-β糖苷酶染色阳性,ET-1和NO分泌增加;随着刺激时间延长(3~24 h),细胞增殖活性下降,SA-β糖苷酶染色阳性细胞增多,ET-1分泌增多,NO分泌减少(P<0.05),p21表达逐渐增多,Bax、Bcl-2表达无明显差异;48~96 h细胞活力持续下降,SA-β糖苷酶染色阳性率无明显变化,ET-1、NO分泌下降,Bax表达逐渐增加,Bcl-2逐渐减少(P<0.05),但p21表达无明显变化;与空白组相比,H2O2刺激后各组细胞MDA持续上升,SOD、GSH-px持续下降(P<0.05).结论 200μmol/L的H2O2刺激24 h可导致HUVEC明显衰老,但随着刺激时间的延长,细胞凋亡增多.
关键词:不同时长过氧化氢人脐静脉内皮细胞衰老
分类号:R965(药理学)
资助基金:广东省自然科学基金(2016A030313755)
论文发表日期:2021-05-25
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 1263-1267 )
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