ETAR?C58多肽生物合成及其对黑色素瘤A375细胞迁移和侵袭的影响
张飞飞1
张梦2
王中山1
1.徐州医科大学麻醉学院,江苏省麻醉学重点实验室 江苏徐州2210042.徐州市中心医院,东南大学附属医院妇产科 江苏徐州221009
摘要：目的 获得ETAR羧基末端58个氨基酸的多肽(ETAR?C58),探讨其对黑色素瘤A375细胞迁移和侵袭的影响.方法 通过PCR方法获得ETAR?C58碱基序列,将其克隆到原核表达载体pWaldo?GFPe,转化到大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达后,经镍柱亲和层析和分子筛层析,得到重组融合多肽,SDS?PAGE分析多肽表达量和纯度,免疫印迹做进一步的鉴定.最后采用Transwell法测定A375细胞的迁移和侵袭能力.结果 成功构建了重组表达载体pWaldo?ETAR?C58,优化表达条件获得了约90％的可溶性蛋白表达量,纯化获得纯度高达95％的融合多肽,免疫印迹的曝光条带和重组多肽的大小相一致,加入2μmol/L ETAR?C58后,A375细胞的迁移和侵袭能力显著下降(P<0.05).结论 ETAR?C58多肽具有抗黑色素瘤的活性,为下一步的临床应用奠定了良好的基础.
关键词：ETAR羧基末端原核表达黑色素瘤细胞迁移细胞侵袭
分类号：R739.5(皮肤肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81600969)
论文发表日期：2021-11-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 2840-2844 )
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