miR⁃30b在低氧环境中调控兔骨髓间充质干细胞成软骨分化
汪仡骁1
吴恒鹏1
万雪2
陈方3
石超4
瓦庆德1
1.遵义医科大学第二附属医院骨科,贵州遵义5630002.遵义医科大学附属医院贵州省细胞工程重点实验室,贵州遵义5630033.遵义医科大学附属医院骨科,贵州遵义5630034.贵黔国际总医院骨科,贵阳550018
摘要：目的 针对软骨缺损难以自行修复的临床难题,探讨miR?30b调控兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨分化中的作用及潜在机制,为软骨修复提供新思路.方法 密度梯度离心法分离BMSCs;流式细胞术和双向诱导分化实验鉴定细胞;CCK?8和Western blot检测细胞在不同CoCl2浓度下增殖能力和HIF?1α表达变化情况;构建稳定表达miR?30b的细胞株,Western blot检测其靶基因SOX9和Wnt/β?catnein信号通路的表达;在低氧环境中成软骨诱导分化,21 d后Western blot和免疫组化染色检测CollagenⅡ与SOX9的表达.结果 流式检测和双向分化实验结果显示细胞高表达CD29和CD34,低表达CD44和CD45,同时具有良好的分化能力.CCK?8结果表明CoCl2溶液诱导的低氧环境可促进BMSCs增殖(P<0.05),且低氧可促进细胞表达HIF?1α.稳定表达miR?30b的细胞在低氧环境中成软骨诱导21 d后,免疫组化和Western blot结果显示CollagenⅡ与SOX9的表达较对照组、空载组及低氧组均明显下调(P<0.01).结论 miR?30b能降低BMSCs在低氧环境中成软骨分化,为表观遗传学调控干细胞修复软骨缺损提供参考.
关键词：软骨缺损miR-30b骨髓间充质干细胞成软骨分化低氧
分类号：R68(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
资助基金：国家自然科学基金(81860322)国家自然科学基金(81660362)贵州省科技计划项目(x?ZK(2021)
论文发表日期：2021-12-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3113-3118 )
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