奥沙利铂通过自噬诱导胃癌细胞耐药的机制
聂微1
严芝强2
成兴真2
刘丽荣1
杨芳3
1.贵州医科大学医学检验学院临床检验基础与血液学教研室 贵阳5500042.贵州医科大学附属医院胃肠外科 贵阳5500043.贵州医科大学医学检验学院临床检验基础与血液学教研室 贵阳550004;贵州医科大学附属医院临床检验中心 贵阳550004
摘要：目的 通过奥沙利铂(Oxaliplatin,OXA)浓度梯度法构建耐药细胞株,探讨OXA治疗胃癌时的耐药机制,为逆转耐药策略提供实验依据.方法 采用OXA浓度梯度培养人胃癌细胞MGC-803,复制OXA耐药细胞株模型(MGC-803/OXA),用倒置显微镜观察细胞的形态学变化、检测细胞耐药指数RI;用流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡,RT-qPCR检测耐药相关基因MDR-1、MRP、ERCC1mRNA表达,Western blot检测耐药相关基因蛋白MDR-1、MRP、ERCC1及自噬相关蛋白P62、Beclin-1和LC3表达;同时用透射电镜观察细胞中自噬体数量及结构变化.结果 OXA浓度梯度培养成功构建耐药细胞株MGC-803/OXA,半抑制浓度(IC50)为62.33μmol/L,RI为7.01(RI>5符合耐药株的要求);MGC-803/OXA细胞株细胞增殖减慢,细胞周期出现G2/M期延长,细胞凋亡率降低,MDR-1、MRP、ERCC1耐药相关基因和蛋白表达高于MGC-803,表明成功构建了胃癌耐药细胞模型MGC-803/OXA;与MGC-803相比,MGC-803/OXA中P62表达降低、Beclin-1表达和LC3-II/I比值增高,具有典型的、内含胞浆成分的空泡状双层膜样结构的自噬体,且数量显著增加.结论 OXA浓度梯度法能成功构建耐药细胞株,表现为增殖减慢、G2/M期延长、凋亡减少,并且自噬水平增强.
关键词：奥沙利铂胃癌耐药性自噬细胞凋亡
分类号：R735.2(消化系肿瘤)
资助基金：贵州省卫生健康委科学技术基金资助项目(gzwjkj2020-1-169)贵州省科技厅计划项目(19NSP015)
论文发表日期：2022-04-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 828-835 )
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