基于高迁移率族蛋白1/外泌体转录活化因子3途径探讨抗结核药吡嗪酰胺肝损伤的机制
程茹
张素霞
上海应用技术大学 上海 201418
摘要：目的 基于高迁移率族蛋白1(HMGB1)/外泌体(EVs)信号转导和转录活化因子3(STAT3)途径探讨抗结核药吡嗪酰胺(PZA)肝损伤的机制.方法 将24只WT小鼠随机分为两组:WT+Con组、WT+PZA组;以及将24只HMGB1基因敲除(HMGB1-KO)小鼠随机分为两组:HMGB1-KO+Con组、HMGB1-KO+PZA组.分别采用免疫印迹分析小鼠肝脏组织中HMGB1表达和M1/M2巨噬细胞极化.体外实验中,通过CCK-8 实验检测梯度浓度的PZA(0、2、4、8、16、32 μmol/L)对人肝细胞系Huh7活力影响.通过超速离心分离HMGB1过度表达的Huh7细胞释放的EVs,并分析其对巨噬细胞(THP-1)活化的影响.用HMGB1 siRNAs转染PZA处理的Huh7细胞,并分离EVs以检测STAT3的蛋白水平.结果 与0d相比,PZA给药后4d、8d、12d、16d小鼠的肝组织中的HMGB1 水平均显著增加(P<0.05).细胞活力显示PZA抑制Huh7细胞增殖,IC50值为(5.62±0.39)μmol/L.与WT+Con组相比,在WT+PZA组中,观察到明显的进行性体质量损失(P<0.001),和血清ALT、AST水平显著升高(P<0.01).与WT+PZA组相比,HMGB1-KO+PZA组体质量显著增加(P<0.001),和血清ALT、AST水平显著降低(P<0.05).与WT+PZA组相比,HMGB1-KO+PZA组肝组织中i-NOS表达显著减少(P<0.001),和CD206的表达显著增加(P<0.05).与EVs-Vector组相比,EVs-HMGB1组THP-1细胞中iNOS表达显著增加(P<0.001).与Con+si-NC组相比,PZA+si-NC组Huh7细胞EVs中STAT3的水平增加,而HMGB1敲除可以减弱PZA的作用.结论 小鼠HMGB1 基因敲除逆转了PZA诱导的肝损伤和M1巨噬细胞激活.此外,PZA诱导的HMGB1上调可以促进肝细胞分泌富含STAT3的EVs,并且该EVs能促进M1巨噬细胞极化.
关键词：高迁移率族蛋白1外泌体转导和转录活化因子3吡嗪酰胺肝损伤
分类号：R575(消化系及腹部疾病)
资助基金：上海市卫生健康委员会科研基金项目(20210221)
论文发表日期：2023-05-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 1224-1231 )
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