沉默信息调节因子2相关酶3调控自噬减轻H2O2诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡
廖贞亮1
冯帮海2
任颖聪1
刘君亚1
郑杰1
梅鸿1
覃松1
1.遵义医科大学附属医院重症医学科 贵州遵义 5630002.遵义市中医院重症医学科 贵州遵义 563000
摘要：目的 探讨沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)调控自噬在H2O2 诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡中的作用.方法 使用对数生长期的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞株(MLE-12),利用0.5 mmol/L H2O2建立MLE-12细胞凋亡模型,分为:正常对照组、H2O2损伤组、H2O2+SIRT3组、H2O2+SIRT3沉默组.CCK8法检测各组细胞增殖活力;SOD、MDA及T-AOC试剂盒检测SOD、MDA及T-AOC水平;构建mRFP-GFP-LC3自噬双标体系,激光共聚焦显微镜观察自噬水平;激光共聚焦显微镜观察线粒体膜电位变化及ROS水平;蛋白免疫印迹实验检测SIRT3、Bcl2、Bax及LC3B表达水平.结果 与正常对照组比较,H2O2 损伤组、H2O2+SIRT3组和H2O2+SIRT3沉默组MDA、ROS水平及自噬小体、自噬溶酶体点数升高(P<0.05),细胞活力、SOD、T-AOC水平和线粒体膜电位降低(P<0.05),SIRT3及Bcl2蛋白表达降低(P<0.05),Bax及LC2Ⅱ蛋白表达升高(P<0.05),以H2O2+SIRT3沉默组最为显著;与H2O2损伤组比较,MDA、ROS水平及自噬小体、自噬溶酶体点数下降(P<0.05),细胞活力、SOD、T-AOC水平和线粒体膜电位升高(P<0.05),SIRT3及Bcl2蛋白表达升高(P<0.05),Bax及LC2Ⅱ蛋白表达降低(P<0.05).结论 SIRT3可以通过抑制自噬、氧化应激及凋亡减轻H2O2诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤.
关键词：沉默信息调节因子2相关酶3自噬凋亡Ⅱ型肺泡上皮细胞
分类号：Q731(生物膜的结构和功能)
资助基金：国家自然科学基金(81960362)贵州省卫生健康委科学技术基金项目(gzwjkj2019-1-068)
论文发表日期：2023-06-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1389-1395 )
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