慢性阻塞性肺疾病大鼠气道成纤维细胞过表达HSG基因对Wnt和MAPK信号通路的影响
杨义1
周洵2
张军2
李波2
王新星3
罗弦2
葛正行2
1.贵州中医药大学(贵阳 550025);贵州中医药大学第二附属医院呼吸内科(贵阳 550003)2.贵州中医药大学第二附属医院呼吸内科(贵阳 550003)3.贵州中医药大学第二附属医院科研教学部(贵阳 550003)
摘要：目的 研究在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmoriary disease,COPD)大鼠气道成纤维细胞中过表达HSG基因(MFN2)对Wnt信号通路的影响.方法 采用蛋白酶诱导的方式构建大鼠COPD模型,然后原代分离 COPD 模型大鼠气道成纤维细胞.构建HSG基因的表达载体,转染大鼠气道成纤维细胞,得到过表达HSG的大鼠气道成纤维细胞.实验一,采用Wnt信号途径激动剂佛波醇酯(TPA)处理细胞,WB、qPCR检测转染后HSG、Wnt5a的表达;实验二,采用MAPK 信号途径激动剂 EGF 因子处理细胞,WB、qPCR检测转染后HSG、ERK1/2的表达;而且每个实验都进行ELISA检测细胞培养液中TGF-β1、PDGF、MMP-9 的含量,流式检测细胞凋亡情况.结果 COPD模型大鼠气道成纤维细胞分离成功.实验一二中,WB、qPCR检测显示过表达HSG能抑制基因Wnt5a和ERK1/2的表达,受相应激动剂处理后,这些基因表达上调而HSG表达受抑制;而ELISA检测结果显示,过表达HSG能降低TGF-β1、PDGF、MMP-9 的含量,受相应激动剂处理后TGF-β1、PDGF、MMP-9 的含量上升,而过表达HSG依然有抑制效果.流式检测细胞凋亡显示过表达HSG会明显上调细胞凋亡率,而相应的激动剂处理会降低过表达HSG促进细胞凋亡的效果.流式检测细胞周期显示过表达HSG对细胞周期的影响并不明显.结论 在COPD 大鼠气道成纤维细胞中过表达HSG基因对Wnt和MAPK 等信号途径均有抑制效果,而且过表达HSG基因有着促进成纤维细胞凋亡,可以推测促进HSG表达具有抑制COPD大鼠气道纤维化的效果.
关键词：慢性阻塞性肺疾病Wnt信号通路成纤维细胞HSGMAPK信号通路
分类号：R563.9(呼吸系及胸部疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81473533)
论文发表日期：2023-11-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2921-2927 )
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