小檗碱联合姜黄素调控M1巨噬细胞极化对动脉粥样硬化的作用机制
陈玉善1
王婷婷2
韩心怡2
华成俊2
靳博远2
尚莎莎1
宗永华1
梁亚州1
1.河南中医药大学第一附属医院心脏中心(郑州 450000)2.河南中医药大学第一临床医学院(郑州 450000)
摘要：目的 探究小檗碱联合姜黄素通过介导巨噬细胞向M1极化对动脉粥样硬化(AS)的作用及机制.方法 常规培养小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7),通过脂多糖(LPS,100 ng/mL)和γ干扰素(IFN-γ)(20 ng/mL)诱导巨噬细胞RAW264.7获得M1型巨噬细胞,建立细胞模型.将细胞分为对照组、模型组、小檗碱组、姜黄素组、小檗碱+姜黄素联合治疗组.通过CCK-8方法检测小檗碱和姜黄素的处理浓度.ELISA检测各组巨噬细胞上清液M1型巨噬细胞标记物iNOS、TNF-α、CXCL9和p-STAT6/STAT6的表达水平;RT-PCR方法检测iNOS、TNF-α和CXCL9 mRNA水平;Western blot检测各组iNOS、STAT6和p-STAT6蛋白水平.此外,通过siRNA技术下调STAT6水平后,通过Western blot检测p-STAT6蛋白水平的表达;ELISA检测iNOS、TNF-α、CXCL9和p-STAT6表达水平.结果 LPS和IFN-γ联合诱导M1巨噬细胞极化中,相较于其他药物浓度组比,小檗碱(25 μmol/L)、姜黄素(20 μmol/L)为最佳药物浓度,两者单用和联用均不能显著抑制RAW264.7细胞活力(P<0.05).与正常组比较,模型组iNOS、TNF-α和CXCL9 mRNA和蛋白水平均升高,p-STAT6/STAT6水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,小檗碱组、姜黄素组、小檗碱+姜黄素联合治疗组中iNOS、TNF-α和CXCL9 mRNA和蛋白水平均降低,p-STAT6/STAT6水平升高,且小檗碱+姜黄素联合治疗组中变化的更加明显,差异有统计学意义(P<0.05).在小檗碱+姜黄素联合治疗组的M1型巨噬细胞中转染STAT6 siRNA后可下调p-STAT6水平,上调iNOS、TNF-α和CXCL9表达,差异有统计学意义(P<0.05).结论 小檗碱和姜黄素对 M1型巨噬细胞的活性均有抑制作用,能够减轻炎症反应.此外,小檗碱与姜黄素联合作用较单药使用更有优势,可能是通过活化STAT6发挥其主要作用机制.
关键词：动脉粥样硬化M1型巨噬细胞小檗碱姜黄素STAT6
分类号：R543.5(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：国家重点研发计划(2020YFC2004706)国家自然科学基金(82004311)河南省中医管理局中医药科学研究专项课题(2018JDZX107)河南省中医管理局中医药科学研究专项课题(2022JDZX026)河南省中医管理局中医药科学研究专项课题(2019JDZX2044)
论文发表日期：2024-07-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1915-1921 )
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