外泌体lncRNA CIAT1促进膀胱癌集体侵袭的机制
刘志聪1
刘戴胤1
龙钧天2
成炽杏1
黄健1
1.中山大学孙逸仙纪念医院泌尿外科(广东 广州 510030);广东省恶性肿瘤表观遗传与基因调控重点实验室(广东 广州 510030)2.广东省恶性肿瘤表观遗传与基因调控重点实验室(广东 广州 510030);中山大学孙逸仙纪念医院肿瘤科(广东 广州 510030)
摘要：目的 探讨膀胱癌源性外泌体长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)CIAT1在肿瘤集体侵袭中的作用及其分子机制,评估其临床相关性及潜在应用价值.方法 首先通过高通量测序筛选出在膀胱癌及淋巴转移膀胱癌组织外泌体中高表达的lncRNAs,并进一步通过扩大临床样本验证其在膀胱癌组织外泌体中的表达情况.通过构建过表达和敲低CIAT1的膀胱癌细胞,我们在体外实验证实了CIAT1外泌体靶向肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)进而诱导肿瘤细胞集体侵袭的功能.接着通过RNA pull-down、RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)、双荧光素酶报告基因实验、染色质RNA免疫共沉淀(Chromatin isolation by RNA purification,ChIRP)及染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)等实验探究了CIAT1通过与hnRNPA2B1互作并调控N-cadherin的转录、进而调控膀胱癌集体侵袭的分子机制.结果 高通量测序(差异倍数>1.5,P<0.05)和临床样本验证(P<0.01)证实CIAT1在膀胱癌组织外泌体中相对表达高于癌旁正常组织外泌体.体外实验证实外泌体CIAT1被CAFs靶向摄取,进而通过调控CAFs显著促进膀胱癌的集体侵袭能力,过表达CIAT1组相比对照组共培养模型的集体侵袭链总数目和总长度均上调(均P<0.01).在机制上,CIAT1通过结合hnRNPA2B1被包装进入外泌体,并被CAFs靶向摄取后调控N-cadherin启动子组蛋白H3K4me3修饰而激活N-cadherin的转录,并且过表达CIAT1组相比对照组共培养模型的集体侵袭链总数目和总长度均上调(均P<0.01);而与过表达CIAT1同时阻断N-cadherin组相比,对照组共培养模型的集体侵袭链总数目和总长度无显著变化,差异无统计学意义(均P>0.05);即阻断N-cadherin可逆转CIAT1对膀胱癌集体侵袭的促进作用.进一步临床数据相关性分析证实CIAT1调控的N-cadherin与膀胱癌患者集体侵袭密切相关(P<0.01).结论 膀胱癌源性外泌体CIAT1能够靶向CAFs调控其N-cadherin转录,进而促进膀胱癌集体侵袭.
关键词：膀胱癌外泌体lncRNA集体侵袭
分类号：R737.14(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(82173230)
论文发表日期：2025-05-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 1299-1308 )
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