可利霉素通过抑制AXL/c-Met/c-Myc信号轴调控肝内胆管细胞癌细胞恶性行为的机制
王童舒1
周敏2
刘慧敏1
朴红心1
1.延边大学附属医院(延边医院)感染性疾病科(吉林延吉 133000)2.淄博泰柏健康管理有限公司临床试验中心(山东 淄博 255000)
摘要：目的 通过体外实验探究可利霉素(carrimycin,CAM)对肝内胆管细胞癌HuCCT1细胞生物学功能的影响,并初步探讨其作用机制.方法 选择肝内胆管细胞癌HuCCT1细胞系,使用CCK-8试剂盒检测CAM对细胞活力的影响,并计算IC50浓度;通过划痕实验验证CAM对细胞迁移能力的影响;使用平板克隆实验检测CAM对细胞克隆形成能力的影响;Transwell侵袭实验检测CAM对细胞侵袭能力的影响;流式细胞术分析CAM对细胞周期进程的影响;WB实验检测CAM对上皮-间充质转化、细胞周期等关键蛋白的表达情况的影响;通过Western blot实验检测CAM对AXL/c-Myc/c-Met信号轴表达情况的影响.结果 与对照组相比,CAM能显著抑制HuCCT1细胞的增殖能力,并且呈浓度依赖性(P<0.05);平板克隆结果显示,CAM能显著抑制HuCCT1细胞克隆形成能力(P<0.05);划痕实验证实经CAM处理后,HuCCT1细胞迁移速度减缓,并且迁移面积变小(P<0.05).经CAM处理的HuCCT1细胞G0/G1期占比上调,S期下调(P<0.05),进一步通过Western blot实验证实,G1/S期转化关键蛋白CCND1和CDK4表达下调,p21表达上调(P<0.05).Transwell侵袭实验结果提示,CAM能抑制HuCCT1细胞侵袭能力;Western blot实验结果提示E-Cadherin表达上调(P＜0.05),N-Cadherin以及Vimentin表达下调(P<0.05).通过Western blot实验验证经AXL重组蛋白处理后的HuCCT1细胞AXL、c-Met和c-Myc的表达上调(P<0.05),而经CAM联合AXL重组蛋白共同处理后HuCCT1细胞的上述蛋白表达均下调(P<0.05).结论 CAM可以抑制肝内胆管细胞癌HuCCT1细胞的增殖、迁移以及侵袭等过程从而发挥抗肿瘤特性,这种作用可能是通过AXL/c-Met/c-Myc介导的.
关键词：肝内胆管细胞癌细胞增殖细胞周期上皮-间充质转化
分类号：R730.5(一般性问题)
资助基金：国家自然科学基金(82260506)吉林省卫生健康科技能力提升项目(2021LC007)
论文发表日期：2025-08-10
在线出版日期：2025-08-19（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2304-2310 )
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