非连续密度梯度法联合上游法在冷冻精液除菌中的应用
庄嘉明
罗璐璐
周颖仪
马春杰
广东省生殖科学研究所(广东省生殖医院)国家卫生健康委员会男性生殖与遗传重点实验室(广东 广州 510600)
摘要：目的 探讨非连续密度梯度法联合上游法对冷冻精液的除菌效果,为冷冻精液在辅助生殖中的安全应用提供实验依据.方法 选取2019年1月至2023年12月医院人类精子库冻存的208例新鲜精液排除致病菌感染的含菌冷冻精液,采用非连续密度梯度法联合上游法处理冻融精液,并模拟体外受精过程对处理后精子上游液行5 d体外培养,监测细菌残留情况.冷冻前精液采用常规细菌培养排除致病菌;解冻后精液和处理后精子上游液及5 d培养液送第三方检测机构检测鉴定所有菌种.结果 208例新鲜精液排除致病菌感染的含菌冷冻精液共检出41种菌,每例含菌1～4种.经非连续密度梯度法联合上游法处理后,精子上游液无菌率为89.42%(186/208),残留菌为粪肠球菌、解葡萄糖醛酸棒状杆菌、B群链球菌、解葡萄糖苷棒杆菌;精子上游液体外培养5 d后,无菌率提升至93.75%(195/208),残留菌为粪肠球菌和B群链球菌.结论 非连续密度梯度法联合上游法可有效清除冷冻精液中大部分细菌,但对粪肠球菌和B群链球菌的菌种清除率小于90%,需优化冷冻前精液细菌鉴定和解冻后精液处理技术以提高冷冻精液在辅助生殖中的安全性.
关键词：冷冻精液微生物污染非连续密度梯度法上游法辅助生殖
分类号：R321-33(人体形态学)R446.19(诊断学)
资助基金：广东省医学科学技术研究基金项目(B2023282)
论文发表日期：2025-09-25
在线出版日期：2025-09-30（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 2839-2843 )
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