GPNMB在缺氧诱导的人绒毛膜滋养层细胞上皮-间质转化中的作用
田甜1
曹萍1
章旭红2
马小红2
李婧睿1
丁学琴3
杨晓明4
1.国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室(宁夏 银川 750004)2.宁夏医科大学基础医学院(宁夏 银川 750004)3.宁夏医科大学临床医学院(宁夏 银川 750004)4.国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室(宁夏 银川 750004);宁夏医科大学基础医学院(宁夏 银川 750004)
摘要：目的 探讨糖蛋白非转移性黑色素瘤蛋白 B(glycoprotein nonmetastatic melanoma protein B,GPNMB)在缺氧诱导的人绒毛膜滋养层细胞 HTR-8/SVneo 上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用.方法 体外培养HTR-8/SVneo细胞,观察缺氧对GPNMB表达的影响.转染GPNMB过表达质粒(pcDNA3.1-GPNMB)或干扰片段(si-GPNMB-1/2)及相应的对照片段(pcDNA3.1-NC 或 si-NC),并使用自噬激动剂雷帕霉素(Rapamycin,Rap)处理,分为Normoxia 组、Hypoxia 组、Normoxia/Hypoxia+si-NC 或 si-GPNMB 组、Normoxia/Hypoxia+pcDNA3.1-NC或 pcDNA3.1-GPNMB 组、Normoxia/Hypoxia+Rap、Hypoxia+Rap+pcDNA3.1-NC 或 pcDNA3.1-GPNMB组.通过qRT-PCR、Western blot、细胞免疫荧光技术检测GPNMB的表达,Western blot检测自噬相关蛋白(LC3B II/I、p62)及EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin)的表达,划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力.结果 与 Normoxia 组相比,Hypoxia 组 HTR-8/SVneo 细胞的GPNMB 的mRNA及蛋白表达水平均降低,p62、N-cadherin蛋白表达量降低,LC3B II/I、E-cadherin蛋白表达量升高(P<0.05);与Hypoxia+si-NC组相比,Hypoxia+si-GPNMB-2 组p62、N-cadherin蛋白表达量降低,LC3B II/I、E-cadherin蛋白表达量升高(P<0.05);与Hypoxia+pcDNA3.1-NC组相比,Hypoxia+pcDNA3.1-GPNMB组则发生相反的变化.与Hypoxia组相比,Hypoxia+Rap组LC3B II/I和E-cadherin蛋白水平增高,而p62 和N-cadherin蛋白水平降低(P<0.05);与Hypoxia+pcDNA3.1-GPNMB 组相比,Hypoxia+Rap+pcDNA3.1-GPNMB 组可减弱 GPNMB 过表达对 HTR-8/SVneo 细胞EMT的促进作用,表现为p62、N-cadherin蛋白表达量降低,LC3BII/I、E-cadherin蛋白表达量升高(P<0.05).结论 在缺氧诱导的HTR-8/SVneo细胞中,GPNMB能抑制细胞自噬、促进EMT过程、增强细胞的迁移与侵袭能力.
关键词：糖蛋白非转移性黑色素瘤蛋白B人绒毛膜滋养层细胞自噬上皮-间质转化迁移侵袭
分类号：R714.25(产科学)
资助基金：国家自然科学基金(82260120)宁夏自然科学基金项目(2023AAC03200)宁夏回族自治区教育厅高等学校科学研究项目(NYG-2022-043)
论文发表日期：2025-10-25
在线出版日期：2025-11-05（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 3135-3144 )
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