金钗石斛总生物碱对TGF-β2诱导的人晶状体上皮细胞增殖、迁移及上皮间质转化的调控作用
时应兰1
黄朝霞2
汤小芳2
石谍1
陈静1
李军1
1.贵州中医药大学中药民族药资源研究院(贵州 贵阳 550025)2.贵州中医药大学基础医学院(贵州 贵阳 550025)
摘要：目的 探讨金钗石斛总生物碱(Dendrobium nobile Lindl alkaloids,DNLA)对TGF-β2诱导的HLEB3细胞增殖、迁移及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的调控作用.方法 体外培养HLEB3细胞并分为对照组(DZ)、模型组(TGF-β2)及给药组(TGF-β2+DNLA).采用TGF-β2诱导HLEB3细胞发生EMT过程,通过倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法、划痕实验、Transwell实验检测细胞增殖、凋亡与迁移.实验结束后提取样本的总RNA进行转录组分析,采用生物信息学处理获得基因表达在转录水平差异的相关信息、生物过程及相关信号通路.通过Western blot 检测EMT相关蛋白,阐明DNLA对晶状体上皮细胞的作用机制.结果 研究发现DNLA为10 μg/mL时较适宜HLEB3细胞的生长,划痕实验48 h后发现TGF-β2+DNLA组迁移率显著下降(P<0.01).Transwell结果表明TGF-β2+DNLA组的细胞迁移能力明显减弱(P<0.05).通过生物信息学发现DNLA防治后发性白内障(posterior capsular opacification,PCO)可能与细胞连接、细胞骨架的构建及纤维连接蛋白结合相关.PCO发病机制可能与TGF-β信号通路及PI3K-Akt信号通路等多条信号通路有关.同时,DNLA可以降低FNI、Smad2/3及α-SMA等蛋白的表达量,升高ZO-1、E-cadherin蛋白的表达,说明DNLA可以通过增强细胞间的黏附连接,减弱细胞迁移能力,进而缓解晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)异常增殖、迁移及EMT,最终对PCO起到防治作用.结论 DNLA能够显著抑制HLEB3细胞的异常增殖与迁移,减轻TGF-β2诱导的EMT过程,进而防控PCO等眼部疾病的发生,其作用机制可能与干预TGF-β/smad信号通路及ZO-1、E-cadherin等纤维化蛋白相关.
关键词：金钗石斛总生物碱上皮间质转化晶状体上皮细胞损伤α-平滑肌肌动蛋白
分类号：R965.2(药理学)
论文发表日期：2025-10-25
在线出版日期：2025-11-05（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 3165-3174 )
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