微管蛋白2A在肝细胞癌中的表达及其在缺氧条件下对肝癌细胞恶性生物学行为的影响
杨伟1
梁念孩2
夏会东2
摆茹2
1.宁夏中西医结合医院消化内科(宁夏 银川 750021)2.宁夏医科大学基础医学院(宁夏 银川 750004)
摘要：目的 分析微管蛋白2A(TUBB2A)在肝细胞癌中的表达及预后价值,检测TUBB2A在缺氧微环境中对肝癌细胞恶性生物学行为的影响.方法 利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库和定量PCR分析TUBB2A在肝细胞癌组织和癌旁组织中的表达及其与肝细胞癌预后的关系.在常氧和缺氧条件下处理肝癌细胞HepG2和Hep3B,采用定量PCR和Western blot检测TUBB2A的mRNA和蛋白表达水平.通过慢病毒感染技术构建稳定过表达和敲除TUBB2A的肝癌细胞株HepG2和Hep3B,在缺氧条件利用CCK-8、集落形成实验、Transwell迁移与侵袭实验检测TUBB2A的表达变化对肝癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响.Western blot检测TUBB2A对肝癌细胞中糖酵解关键蛋白,葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)和乳酸脱氢酶A(LDHA)表达的影响.结果 TCGA数据库分析显示,TUBB2A在肝癌中的表达显著高于癌旁组织(P<0.01),TUBB2A高表达的肝细胞癌患者的总生存率更低(P<0.01).TUBB2A在30例临床肝细胞癌组织标本中的mRNA表达水平高于相应癌旁组织(P<0.05),同时TUBB2A的表达与肝癌患者的临床分期(Ⅰ期和Ⅳ期)和甲胎蛋白(AFP)水平呈正相关(P均<0.05).在缺氧诱导的肝癌细胞HepG2和Hep3B中,TUBB2A mRNA和蛋白表达水平均显著上升(P<0.05,P<0.01).缺氧条件下,在肝癌细胞HepG2和Hep3B中过表达TUBB2A,能够促进肝癌细胞的增殖、迁移与侵袭,同时上调糖酵解关键蛋白GLUT1、PKM2和LDHA的表达;而敲除TUBB2A后,两种肝癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力均受到抑制,GLUT1、PKM2和LDHA的表达也显著降低(P<0.05,P<0.01).结论 TUBB2A在肝细胞癌中高表达,与患者预后不良呈正相关.TUBB2A促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭与糖酵解的作用可能与缺氧微环境相关,其可能成为肝细胞癌预后与治疗的潜在靶点.
关键词：TUBB2A肝细胞癌缺氧增殖与转移有氧糖酵解
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：宁夏自然科学基金项目(2023AAC03721)
论文发表日期：2025-10-25
在线出版日期：2025-11-05（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 3175-3184 )
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