精浆外泌体miR-26a-5p靶向PTEN调控特发性畸形精子症的分子机制及诊断价值
刘春辉1
吴瑞鹏2
王志强1
陕文生1
李少君3
1.甘肃省妇幼保健院(甘肃省中心医院)男科(甘肃 兰州 730050)2.甘肃省人民医院神经内科(甘肃 兰州 730010)3.甘肃省妇幼保健院(甘肃省中心医院)泌尿外科(甘肃 兰州 730050)
摘要：目的 探讨精浆外泌体miR-26a-5p及其靶基因在特发性畸形精子症中的作用机制,揭示其调控精子形态异常的通路,为临床诊断和靶向干预提供依据.方法 采用病例对照研究设计,纳入154例男性受试者(畸形精子症组TZS 84例,正常对照组NC 70例).通过精浆外泌体分离,筛选差异表达miRNA,分析预测靶基因及信号通路.利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-26a-5p与PTEN的直接结合作用,通过实时荧光定量PCR、Western blot检测miRNA及蛋白表达水平.采用Spearman相关性分析评估miR-26a-5p、PTEN与精子形态参数的关系,并通过ROC曲线分析诊断效能.结果 精浆外泌体miRNA测序共鉴定出11种差异表达miRNA,其中miR-26a-5p在TZS组显著上调(P<0.05),且与TZS组的正常形态精子占比呈负相关(r=-0.762,P<0.05).PTEN为miR-26a-5p的直接靶基因,其表达在TZS组显著降低(P<0.05),并与TZS组的精子正常形态率呈正相关(r=0.821,P<0.05).miR-26a-5p与PTEN呈负相关(r=-0.878,P<0.05).双荧光素酶实验证实miR-26a-5p可特异性抑制PTEN 3'UTR活性(荧光素酶活性降低 45%,P<0.05).功能富集分析显示,miR-26a-5p-PTEN轴通过调控PI3K/AKT/mTOR、p53、Wnt/β-catenin及NF-κB通路,加剧氧化应激、DNA损伤及精子细胞分裂异常.ROC曲线分析表明,miR-26a-5p与PTEN对畸形精子症的诊断效能分别为AUCROC=0.785(灵敏度78.9%,特异度71.3%)和AUCROC=0.754(灵敏度73.3%,特异度75.1%).结论 miR-26a-5p通过靶向抑制PTEN,激活PI3K/AKT/mTOR等通路并抑制DNA修复功能,导致氧化应激积累及精子形态异常.精浆外泌体miR-26a-5p高表达与PTEN低表达的组合模式显示出对特发性畸形精子症的诊断潜力,其分子机制为标志物开发提供了理论依据.靶向沉默miR-26a-5p或联合AKT/mTOR抑制剂及抗氧化治疗,可能成为改善精子形态的新策略.
关键词：精浆外泌体畸形精子症miR-26a-5pPTEN分子机制
分类号：R697(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
资助基金：甘肃省科技计划资助项目(23JRRA1743)甘肃省科技计划资助项目(23JRRA1754)兰州市科技发展指导性计划项目(2020-ZD-4)
论文发表日期：2025-10-25
在线出版日期：2025-11-05（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 3256-3266 )
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