改良全骨髓贴壁法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞及其生物学特性
黄玉圣1
刘心雨2
周穗珊2
1.深圳市宝安区中心医院脊柱外科(广东 深圳 518100)2.南方医科大学南方医院创伤骨科(广东 广州 510515)
摘要：目的 建立大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)高效的分离、培养和纯化的方法,同时探究BMSCs的生物学特性.方法 取3～4周龄的SD雄性大鼠脱臼处死,在无菌条件下分离双侧股骨、胫骨,分别采用传统冲髓法和改良全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMSCs,待细胞融合率达80%时,进行消化传代及纯化培养.倒置显微镜下观察细胞形态;吉姆萨染色后观察BMSCs克隆形成情况及克隆形成率;流式细胞仪检测细胞表面特异抗原(CD29和CD45);利用CCK-8检测细胞增殖能力,同时绘制细胞传代后第1～8天的生长曲线;诱导BMSCs向成骨细胞分化,分别利用碱性磷酸酶(ALP)染色、定量及茜素红染色、定量方法,对两组BMSCs的成骨分化能力进行检测;另一方面,诱导BMSCs向脂肪细胞分化,利用油红O染色及定量方法,对两组BMSCs的成脂分化能力进行检测.结果 相较于对照组,应用改良全骨髓贴壁培养法体外分离、纯化培养的SD大鼠BMSCs形态好、纯度高、增殖能力强.同时,在细胞生物学特性方面,改良组BMSCs较对照组BMSCs的成骨分化能力轻微增强,成脂分化能力轻微减弱.结论 改良全骨髓贴壁法分离培养的SD大鼠BMSCs,其细胞形态好、增殖能力强、分化能力优,可以选择作为组织工程的种子细胞.
关键词：骨髓间充质干细胞改良全骨髓贴壁法生物学特性分化
分类号：R-331(实验医学、医学实验)
资助基金：广东省医学科学技术研究基金项目(C2024061)
论文发表日期：2025-12-25
在线出版日期：2026-01-04（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 3860-3866 )
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