超速离心法与聚乙二醇沉淀法提取人多发性骨髓瘤细胞来源外泌体的比较
熊文杰
刘焕勋
史敦云
楼瑾
张琼丽
1.深圳市第二人民医院,广东 深圳,5180352.深圳市第二人民医院,广东 深圳,5180353.深圳市第二人民医院,广东 深圳,5180354.深圳市第二人民医院,广东 深圳,5180355.深圳市第二人民医院,广东 深圳,518035
摘要：目的:鉴定比较超速离心法和聚乙二醇(PEG)沉淀法提取人多发性骨髓瘤细胞来源外泌体.方法:人多发性骨髓瘤细胞系RPMI 8226经去除外泌体无血清培养24 ～ 48 h培养后,分别使用超速离心法和PEG沉淀法进行外泌体的提取,分别测定两种方法所得外泌体的蛋白含量,并进行电镜鉴定比较.结果:超速离心法所提取外泌体测得实际浓度为(1.095±0.031)μg·μL-1,沉淀法所提取外泌体实际浓度为(2.069±0.086)μg·μL-1,组间比较,差异具有统计学意义(P＜0.001);超速离心法测得外泌体蛋白总量(109.513±3.113)μg,沉淀法所提取外泌体测得蛋白总量(206.883±8.580)μg,组间比较,差异具有统计学意义(P＜0.001).电镜下超速离心法分离外泌体清晰可见,沉淀法提取的外泌体含有较多杂质,影响电镜观察.结论:超速离心法方法简单,耗时少,外泌体纯度高,可用于外泌体的蛋白、DNA和免疫功能研究.沉淀法耗时较长,所得外泌体杂质蛋白含量多,不适用于外泌体蛋白分析,可用于RNA分析.
关键词：多发性骨髓瘤外泌体超速离心法聚乙二醇沉淀法
分类号：R730(一般性问题)
资助基金：深圳市科技计划(JCYJ20150330102401094)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 6-8,封3 )
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