纤维蛋白原Bβ链变异基因的体外重组
崔让庄
毛用敏
陈倩
赵燕行
1.天津市心血管病研究所3000512.天津市心血管病研究所3000513.天津市心血管病研究所3000514.天津市心血管病研究所300051
摘要：目的:采用基因重组技术将可能与血栓形成有关的纤维蛋白原Bβ链羧基端的KGD结构置换为EGS结构,提供一种简单方便的构建变异克隆的方法.方法:在含有正常BβcDNA的pMLP质粒(简称p 668)的溶液中,加入变异引物、筛选引物和dNTP.在T4聚合酶和T4连接酶的作用下,合成除变异碱基外,其他碱基均与原正常Bβ链互补的变异Bβ链,经过两次在不同菌系的大肠杆菌中的表达与筛选,获取变异克隆.结果:由于变异克隆引入了BstBI这个新的酶切位点,可通过电泳证实变异克隆构建的成功与否,本研究经电泳及DNA序列分析证实重组体确系已含变异EGS结构的克隆.结论:本方法为一构建变异克隆的分子生物学技术,可用于任何克隆的构建.本研究成功地获得了纤维蛋白原Bβ链羧基端KGD转换为EGS的变异体,为研究纤维蛋白原Bβ链的KGD结构区的功能奠定了基础.
关键词：纤维蛋白原基因转变重组遗传
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2000-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 407-409 )
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