人甲状腺过氧化物酶抗原决定簇基因在 E.coli细胞中的表达
何红鹏
方佩华
吕枚
姬永丽
1.300052,天津医科大学总医院核医学科2.300052,天津医科大学总医院核医学科3.300052,天津医科大学总医院核医学科4.300052,天津医科大学总医院核医学科
摘要：目的:探索在E.coli BL21中表达hTPO抗原决定簇片段(AA568～AA874).方法:将hTPO抗原决定簇基因(1 702～2 622,编号相对于起始密码子)连接到表达型载体pGEX-4T-3,构建重组表达质粒.然后转化E.coli Bl21,IPTG诱导表达.表达产物采用亲和层析方法纯化,SDS-PAGE法测定其分子质量,ELISA法鉴定免疫学活性,考马斯亮蓝染色法定量.结果:成功地表达了hTPO抗原决定簇基因.纯化的GST-hTPO融合蛋白分子质量为61.4 ku,hTPO片段分子质量为37.6 ku.以此作为抗原按ELISA法分别与TPOAb阳性血清或阴性血清反应,结果表明GST-hTPO及hTPO片段均与TPOAb特异性结合.纯化的GST-hTPO产量为10 mg/L培养基;hTPO片段产量为1.2 mg/L培养基.结论:利用基因工程技术可获得高纯度的GST-hTPO融合蛋白及hTPO片段,产物具有良好的免疫学活性.
关键词：碘化物过氧化物酶甲状腺基因表达
分类号：R5(内科学)
资助基金：天津市科委科技攻关项目(963108411)
论文发表日期：2001-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 732-735 )
英文信息