逆转录病毒介导的牛生长激素基因转染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞
宋诗铎1
郑东钧1
祁伟1
隋志芳2
李为1
方晖1
何屏1
魏殿军1
1.300211,天津医科大学第二医院,天津市感染性疾病研究2.天津医科大学泌尿研究所
摘要：目的:以牛生长激素(bGH)为模型,建立逆转录病毒载体转移系统,体外转染鼠成纤维细胞株NIH3T3和人胚肺成纤维细胞2BS,以获得bGH表达.方法:将PCR扩增的bGH基因片段插入逆转录病毒载体pSXLC-MDR相应酶切位点,获得的重组逆转录病毒质粒.应用脂质体方法转染重组质粒进入包装细胞PA317,筛选长春新碱抗性克隆株,收集上清液感染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞2BS,筛选携带bGH基因的成纤维细胞的克隆株3T3bGH和2BS/bGH.结果:RT-PCR分析表明基因转染组的3T3/bGH细胞和2BS/bGH细胞在相当于680bp处有一清晰的条带,而空质粒对照组无相应条带出现.RIA分析表明转染基因细胞的培养液及胞浆蛋白有bGH蛋白表达,而作为对照的3T3/mdr细胞和NIH/3T3细胞均无此蛋白表达.结论:应用逆转录病毒IRBS载体系统转染bGH基因进入成纤维细胞,该系统易筛选,转染效率较高.
关键词：逆转录病毒科生长激素成纤维细胞动物牛人类学肺胚胎学细胞学
分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：天津市自然科学基金(941409007)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 94-97 )
英文信息