重组变异纤维蛋白原体外表达及对凝血功能的影响
毛用敏
平立芳
程津新
陈倩
赵福梅
赵炳让
崔让庄
1.300051,天津市心血管病研究所2.300051,天津市心血管病研究所3.300051,天津市心血管病研究所4.300051,天津市心血管病研究所5.300051,天津市心血管病研究所6.300051,天津市心血管病研究所7.300051,天津市心血管病研究所
摘要:目的:采用基因重组技术和细胞培养方法制备纤维蛋白原(Fbg)β链K 318 E/D 320 S变异蛋白,观察此变异蛋白对凝血反应的影响.方法:用Site-directed mutagenesis方法构建变异重组质粒;磷酸钙法将此质粒转染CHO细胞;经细胞培养表达变异蛋白;硫酸铵沉淀法和免疫亲和层析法获取蛋白.进行纤维蛋白多肽A、B释放实验和在3种Ca2+浓度下的纤维蛋白聚合实验,并评价此变异蛋白的功能.结果:变异与正常Fbg纤维蛋白多肽A、B释放实验无差异.纤维蛋白聚合实验显示,在不同Ca2+条件下两者间Lag period,Vmax和最终光密度均有显著性差异(P<0.05).结论:B β链变异蛋白可能引起Fbg D区结构的变化,使纤维蛋白聚合位点和Ca2+结合位点不能发挥正常功能,致使纤维蛋白聚合反应速度减慢及纤维蛋白纤维粗细出现异常.
关键词:纤维蛋白原质粒细胞培养的
分类号:R55(血液及淋巴系疾病)
资助基金:天津市自然科学基金(013610711)
论文发表日期:2002-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 420-423 )
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