用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA制备方法的比较
剧海
梁东春
郭刚
张镜宇
1.300070,天津医科大学内分泌所生化与分子生物学研究室2.300070,天津医科大学内分泌所生化与分子生物学研究室3.300070,天津医科大学内分泌所生化与分子生物学研究室4.300070,天津医科大学内分泌所生化与分子生物学研究室
摘要：目的:比较4种用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA的制备方法,以寻求一种稳定、简便的DNA模板制备方法,用于毕赤酵母重组子的分析.方法:分别用玻璃珠法、煮沸法、煮-冻-煮法以及直接法制备毕赤酵母基因组DNA模板,在相同条件下进行PCR扩增并比较其差异.结果:煮-冻-煮法与玻璃珠法制备的模板进行PCR均可取得理想的实验结果.以煮沸法制备模板作PCR时结果受所用模板浓度的影响很大,稳定性较差.直接法(即直接用未经处理的菌体作模板)的PCR结果随机性较大,实验结果最不理想.结论:煮-冻-煮法所需时间少、费用低、操作简便而且结果稳定,是采用毕赤酵母表达系统进行PCR鉴定时制备模板DNA的首选方法.
关键词：毕赤酵母DNA聚合酶链反应
分类号：R58(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金：天津市自然科学基金(023608711)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 270-272 )
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