人骨保护素成熟肽表达载体的构建、表达及重组蛋白免疫学鉴定
王宝利
戴芳
郭刚
邱明才
张镜宇
1.300052,天津医科大学总医院内分泌科、天津医科大学内分泌所2.300052,天津医科大学总医院内分泌科、天津医科大学内分泌所3.300052,天津医科大学总医院内分泌科、天津医科大学内分泌所4.300052,天津医科大学总医院内分泌科、天津医科大学内分泌所5.300052,天津医科大学总医院内分泌科、天津医科大学内分泌所
摘要：目的:构建人骨保护素(OPG)成熟肽cDNA重组表达载体,实现其在毕赤酵母中的高效表达.方法:由人成骨细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增得到人OPG成熟肽cDNA,克隆入分泌型表达载体pPIC9K,转化酵母细胞,G418筛选多拷贝整合的重组子进行甲醇诱导表达,产物行Western blotting鉴定.结果:成功构建了人OPG成熟肽表达载体,该载体能在酵母细胞中获得分泌表达,诱导96 h的表达量占上清总蛋白的30%.重组蛋白相对分子质量约55 ku,可被OPG抗体识别.结论:重组人OPG成熟肽在酵母表达系统获得较高水平表达,为进一步研究开发基因工程药物准备了条件.
关键词：破骨细胞抑制因子免疫毕赤酵母基因表达
分类号：Q8(生物科学)
资助基金：国家自然科学基金(30271154)天津市自然科学基金(023609711)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 691-693 )
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