人胎儿肝干细胞的分离及鉴定
张金卷
杜智
李涛
朱争艳
王毅军
聂福华
宋继昌
1.300170,天津市第三中心医院肝胆外科;卫生部人工细胞工程技术研究中心2.300170,天津市第三中心医院肝胆外科;卫生部人工细胞工程技术研究中心3.300170,天津市第三中心医院肝胆外科;卫生部人工细胞工程技术研究中心4.300170,天津市第三中心医院肝胆外科;卫生部人工细胞工程技术研究中心5.300170,天津市第三中心医院肝胆外科;卫生部人工细胞工程技术研究中心6.300170,天津市第三中心医院肝胆外科;卫生部人工细胞工程技术研究中心7.300170,天津市第三中心医院肝胆外科;卫生部人工细胞工程技术研究中心
摘要:目的:探索人胎儿肝干细胞的分离及鉴定方法.方法:改进Seglen胶原酶(IV型)原位灌注结合Percoll密度梯度离心分离纯化4~6个月水囊引产男性胎儿的肝干细胞,CO2培养箱培养,光镜、电镜下观察细胞特点,进行肝干细胞细胞标志SABC免疫组化染色.结果:平均细胞产量(2.10±0.50)×107,细胞活性率为(92.30±1.23)%.光镜下呈游离状态、大小不等的单个细胞,约为正常肝细胞1/5~1/3大小;电镜下细胞表面可见少量短而小的微绒毛状突起,卵圆形细胞核,核/浆比例较大等特点;甲胎蛋白、细胞角蛋白8、19及α-1-抗胰蛋白酶免疫组化染色呈阳性,白蛋白及白细胞共同抗原染色呈阴性表现,培养3周可形成克隆样结构.结论:改进的Seglen胶原酶原位灌注结合Percoll密度梯度离心法可成功分离、纯化人胎儿肝干细胞.
关键词:胎儿肝干细胞细胞分离免疫组织化学
分类号:R3(基础医学)
资助基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(2001AA216051)
论文发表日期:2005-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 268-270 )
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