重组人胰岛素样生长因子1的制备
梁东春
左爱军
吴亚锋
郭刚
张镜宇
1.300070,天津市内分泌研究所2.300070,天津市内分泌研究所3.300070,天津市内分泌研究所4.300070,天津市内分泌研究所5.300070,天津市内分泌研究所
摘要：目的:建立人胰岛素样生长因子1(IGF-1)基因大肠杆菌高效表达系统及rhIGF-1的初步纯化方法.方法:将人IGF-1基因克隆人原核表达质粒载体pBV220,重组质粒转化大肠杆菌DH5α,温度诱导表达,Western Blot对表达产物进行鉴定.超滤离心纯化rhIGF-1,纯化产物行高效液相色谱分析.H3-TdR掺入法测定所制备rhIGF-1的促细胞增殖活性.结果:成功构建了重组质粒pBV-IGF-1,聚丙烯酰胺凝胶电泳可见与预期7.5 ku大小相符的蛋白条带,Western Blot证实该条带即为rhIGF-1.超滤离心一步纯化后rhIGF-1纯度即可达95%以上.H3-TdR结果显示,所制备的rhIGF-1可促进体外培养成肌细胞增殖.结论:成功建立了rhIGF-1的制备及纯化方法,表达产物经体外试验证实具有促细胞增殖的生物活性.
关键词：DNA重组 胰岛素样生长因子1 大肠杆菌
分类号：R3(基础医学)
资助基金：天津市自然科学基金(033801611)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 434-436 )
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