人脂联素基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
刘德敏
杨莉丽
孙颖
张捷
1.300070,天津医科大学代谢病医院2.300070,天津医科大学代谢病医院3.300070,天津医科大学代谢病医院4.300070,天津医科大学代谢病医院
摘要:目的:克隆人脂联素(adiponectin)基因,并在大肠杆菌宿主系统中高效表达出adiponectin蛋白进行鉴定.方法:从人皮下脂肪组织提取总RNA,确认其正确性后经RT-PCR扩增得到全长cDNA片段,此片段经纯化回收后克隆至pMD 18-T载体,经行DNA序列分析,进一步克隆构建到表达载体至pET-DEST 42中,用IPTG在大肠杆菌中诱导表达.结果:含重组adiponectin质粒的大肠杆菌经0.4 mmol/T的IPTG诱导6 h后有高表达.结论:adiponectin基因的克隆构建和在大肠杆菌中的表达获得成功.
关键词:胞间信号肽类和蛋白质类克隆分子基因表达大肠杆菌
分类号:R5(内科学)
资助基金:Tianjin Natural Sci. Found(20030325)
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 148-150 )
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