汉坦病毒S基因在大肠埃希菌中的克隆及表达
徐昭1
陈锦英1
李力2
杨东靖2
1.300070,天津医科大学微生物教研室2.天津市卫生防病中心
摘要：目的:在大肠埃希菌中克隆和表达汉坦病毒SEO型及HTN型S基因.方法:PCR扩增汉坦病毒SEO型L99株及HTN型Z10株S基因读码区,前者经EcoRⅠ及XhoⅠ双酶切,后者经SacⅠ及XhoⅠ双酶切,将两者定向克隆入pET32a(+),转入感受态E.coli Top10.获取重组质粒,经PCR、双酶切及序列分析鉴定后,转入E.coli BL21感受态,经IPTG诱导表达,其产物经SDS-PAGE和Western-blot检测.结果:SEO型L99株及HTN型Z10株S基因正确克隆于pET32a(+),目的蛋白的分子质量约为67.1 ku,表达量占菌体总蛋白的40%以上,Western-blot有特异性条带.结论:SEO型及HTN型汉坦病毒S基因在大肠埃希菌中获得表达,为其后的应用奠定了基础.
关键词：汉坦病毒大肠杆菌克隆基因表达
分类号：R3(基础医学)
资助基金：天津市自然科学基金(033605311)天津市科技发展计划(043113511)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 436-438 )
英文信息