小鼠睫状神经营养因子基因的克隆及真核表达载体的构建
袁松涛1
左爱军2
李宁东3
梁东春2
赵堪兴4
1.300070,天津医科大学;天津市眼科医院2.天津市内分泌研究所3.天津市眼科医院4.300070,天津医科大学
摘要:目的:分别构建野生型和截短型小鼠睫状神经营养因子(CNTF)基因的真核表达载体.方法:通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增小鼠CNTF野生型全长编码序列,体外定点突变获取截短型CNTF的互补DNA(cDNA)编码序列,将上述两序列分别克隆至pGEM-TEasy载体,经限制性内切酶EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切后,将野生型和截短型CNTF基因连入pTracer-CMV真核表达载体,DNA测序鉴定.结果:PCR成功扩增了野生型和截短型CNTF基因,DNA序列分析证实两种真核表达载体中的CNTF序列与Gene Bank中目的序列一致.结论:野生型和截短型CNTF基因真核表达载体的成功构建为视网膜色素变性(RP)的基因治疗研究奠定了基础.
关键词:睫状神经营养因子基因克隆真核表达载体视网膜色素变性小鼠
分类号:Q3(遗传学)
资助基金:国家自然科学基金(30070805)
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 476-478 )
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