携带人α1,2-岩藻苷转移酶基因转基因小鼠的建立
刘秉乾
马腾骧
王广有
李胜芝
张玥
1.300211,天津市泌尿外科研究所2.300211,天津市泌尿外科研究所3.300211,天津市泌尿外科研究所4.300211,天津市泌尿外科研究所5.300211,天津市泌尿外科研究所
摘要：目的:建立携带人α1,2-岩藻苷转移酶[alpha(1,2)-fucosyltransferase,HT]基因的转基因小鼠模型.方法:采用受精卵显微注射法,将人HT转基因构件导入昆明白小鼠受精卵的雄原核内,然后将注射后仍健康的受精卵植入假孕母管内,等其自然分娩.对G0代小鼠,应用聚合酶链反应(PCR)和Southern杂交检测人HT基因的整合情况、应用逆转录PCR(RT-PCR)检测人HT基因mRNA水平的表达,应用流式细胞计数(FCM)检测H抗原及α-Gal抗原在小鼠外周血单核细胞(PBMCs)表面的表达.结果:注射后卵的存活率和幼鼠出生率分别为84.9%(968/1 140)和10.8%(105/968),外源基因的整合率为7.6%(8/105),基因整合阳性小鼠中有7只的心、肝、肾及骨骼肌组织均有人HT mRNA表达,并且PBMCs表面H抗原表达阳性,表达强度为人PBMCs的95%～150%,同时α-Gal抗原表达减少,为正常小鼠的5%～10%.转基因小鼠已经稳定传3代.结论:携带人α1,2-岩藻糖苷转移酶基因的转基因小鼠模型已制备成功.
关键词：岩藻糖基转移酶类小鼠转基因基因表达移植物排斥
分类号：R3(基础医学)
资助基金：天津市科技发展基金(043803411)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 708-710,后插2 )
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