重组人甲状旁腺激素相关蛋白1-141的表达和生物活性测定
刘新宇1
梁东春2
左爱军2
张镜宇2
郭刚2
1.300070,天津医科大学生物化学教研室2.天津市内分泌研究所
摘要：目的:建立表达及纯化重组人甲状旁腺激素相关蛋白1-141(rhPTHrP1-141)的方法.方法:将已构建好的表达载体pQE-30Xa/hPTHrP1-141重组质粒转化大肠杆菌M15 [PREP4],IPTG诱导表达,Western Blot鉴定表达产物.金属螯合亲和层析去除杂蛋白后,超滤离心进一步纯化目的蛋白.使用UMR106细胞测定所制备的rhPTHrP1-141对cAMP生成的刺激作用.结果:SDS-PAGE可见与预期大小相符的蛋白条带,Western Blot证实该条带即为rhPTHrP1-141.目的蛋白经纯化后,能刺激UMR106细胞内cAMP浓度升高,有剂量依赖关系.结论:成功建立了rhPTHrP1-141的制备及纯化方法,PTHrP1-141的表达量可达到60 mg/L培养基.表达产物经体外实验证实具有生物活性.
关键词：甲状旁腺激素相关蛋白质重组蛋白质类大肠杆菌基因表达调控
分类号：R4(临床医学)
资助基金：国家自然科学基金(39970348)天津市自然科学基金(993804211)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 33-36 )
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