非糖基化尿激酶原的研究
杨波1
李天德1
陈惠鹏2
胡显文2
胥照平2
张正光2
1.100853,北京,中国人民解放军总医院心内科2.军事医学科学院生物工程研究所
摘要：目的:构建一种非糖基化、抗凝血酶激活的尿激酶原突变体,并观察其表达及活性情况.方法:使用PCR扩增的方法,将302位天冬酰胺(Asn302)突变为丙氨酸(Ala302),去掉糖基化位点;将156位精氨酸(Arg156)突变为赖氨酸(Lys156),去掉凝血酶作用位点.将突变体基因转染到哺乳动物细胞中.收取无血清培养上清,并用纤维蛋白板溶解圈法鉴定活性.结果:PCR产物经琼脂糖电泳鉴定分子质量略大于1 200bp,与理论分子质量1 296 bp基本符合.转染成功的细胞株用于扩大培养.纤维蛋白板溶解圈法测定上清活性为295.58IU/mL.结论:非糖基化、抗凝血酶的尿激酶原突变体构建成功.转染后细胞生长良好,表达水平较高.
关键词：尿纤溶酶原激活物突变基因表达糖基化血栓溶解疗法
分类号：R9(药学)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 96-98,插3 )
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