绿色荧光蛋白标记的人脂联素真核表达载体的构建
刘德敏
杜春红
孙颖
张捷
1.300070,天津医科大学代谢病医院2.300070,天津医科大学代谢病医院3.300070,天津医科大学代谢病医院4.300070,天津医科大学代谢病医院
摘要：目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)标记的人脂联素(Adiponectin)真核表达质粒.方法:用本实验室已构建好的人脂联素克隆载体pMD18-T/Adiponectin为模板,结合已设计好的特异性引物,采用PCR方法克隆出Adiponectin目的片段,将该目的片段再连至真核表达载体pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO上,转化入TOP10感受态细胞中,通过筛选得到融合有绿色荧光蛋白的重组质粒pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-Adiponectin.结果:PCR获得长度为736 bp的目的片段,经pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO真核表达载体连接、筛选及序列分析后,证实所插入的目的片段与gene bank检索的人脂联素cDNA序列(Accession NM-004797)100%匹配.结论:绿色荧光蛋白标记的人脂联素真核表达载体构建成功.
关键词：脂类遗传载体质粒绿色荧光蛋白质类聚合酶链反应
分类号：R3(基础医学)
资助基金：天津市教委资助项目(2003025)天津市自然科学基金(043609211)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 324-325,C2 )
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