人Prp8蛋白基因片段的克隆
洪敬欣
步天栩
史雪彬
邵洁
姚智
杨洁
1.天津医科大学免疫学教研室,3000702.天津医科大学免疫学教研室,3000703.天津医科大学免疫学教研室,3000704.天津医科大学免疫学教研室,3000705.天津医科大学免疫学教研室,3000706.天津医科大学免疫学教研室,300070
摘要：目的:构建人Prp8基因全长真核表达质粒.方法:从HeLa细胞中提取总体RNA,两步法合成cDNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,扩增出人Prp8基因的四段序列,首先克隆至pTZ57R/T载体,再定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建pcDNA3.1(+)-Prp8重组质粒.结果:RT-PCR法获得Prp8基因的4段序列,长度分别为2025、1 090、1 966、1 963 bp,分别与pTZ57R仃载体连接后,选择合适的酶切位点再连接成全长序列,然后将全长序列和pcDNA3.1(+)真核表达载体连接、转化、酶切鉴定及序列分析后,证实pcDNA3.1(+)-Prp8重组质粒构建成功.结论:成功克隆了人Prp8的编码基因,并构建了表达载体pcDNA3.1(+)-Prp8.
关键词：抗体单克隆基因表达遗传载体质粒真核细胞逆转录聚合酶链反应人类
分类号：R3(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(30670441)天津市科委项目(043802811)高等学校博士学科点专项科研基金(NCET-04-0245;20040062003)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 801-803,后插1 )
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