超抗原VEGF-SEA融合基因的克隆与表达
边小鹤
孙嘉琳
朱宏丽
罗金凤
胡坤
1.天津科技大学生物工程学院,3004572.天津科技大学生物工程学院,3004573.天津科技大学生物工程学院,3004574.天津科技大学生物工程学院,3004575.天津科技大学生物工程学院,300457
摘要：目的:构建血管内皮生长因子-葡萄球菌肠毒素A(VEGF-SEA)基因的原核表达质粒,获得VEGF-SEA融合蛋白.方法:制备VEGF-SEA基因片段,插入pET40b构建重组质粒pET40b-VEGF-SEA,经序列分析正确后转化大肠杆菌B121(DE3),进行IVTG诱导表达蛋白.用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达蛋白的相对分子质量及表达形式,并对产物采用His?Bind Buffer kit试剂盒纯化.结果:获得VEGF-SEA基因片段长1 130 bp,经序列分析与预期完全一致,其表达出目的蛋白的大小约为66.2 ku,以包涵体形式表达,经纯化,纯度达到90%以上.结论:表达载体pET40b-VEGF-SEA构建成功,VEGF-SEA融合蛋白获得高效表达,本实验为进一步研究VEGF-SEA蛋白的活性及其功能,探讨超抗原抑制肿瘤生长作用奠定了基础.
关键词：血管内皮生长因子类葡萄球菌属肠毒素类超抗原基因表达克隆分子
资助基金：天津市科委应用基础研究重点项目(06YFJZJC02600)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 783-785 )
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