人脂联素原核表达载体PQE30/ADPN的构建及在大肠杆菌中的表达
史晓文
刘德敏
孙颖
张捷
1.天津医科大学代谢病医院、卫生部激素与发育重点实验室,3000702.天津医科大学代谢病医院、卫生部激素与发育重点实验室,3000703.天津医科大学代谢病医院、卫生部激素与发育重点实验室,3000704.天津医科大学代谢病医院、卫生部激素与发育重点实验室,300070
摘要：目的:构建人脂联素重组表达载体PQE30/ADPN,并在大肠杆菌宿主系统中表达出脂联素蛋白,对表达产物进行鉴定.方法:将构建好的人脂联素克隆载体PUC57/ADPN与原核表达载体PQE30通过双酶切方法位点特异地连接在一起,再转化人大肠杆菌JM109感受态细胞中.通过筛选得到含有人脂联素基因的重组载体PQE30/ADPN,并用IPTG在大肠杆菌M15中诱导表达.结果:PCR获得长度为753 bp目的片段,经PQE30原核表达载体连接、筛选及序列分析后,证实所插入的目的片段与GenBank检索的人脂联素cDNA序列(Accession NM-004797)100%匹配;含重组Adiponectin质粒的大肠杆菌经0.4mmol/L的IPTG诱导6h后有表达.结论:应用并成功构建了人脂联素原核表达载体PQE30/ADPN,且在大肠杆菌中获得有效表达.
关键词：胞间信号肽类和蛋白质类基因表达大肠杆菌遗传载体脂联素
资助基金：天津市教委基金项目(2003025)天津市自然科学基金资助项目(043609211)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 843-845 )
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