稳定表达rhPDGF-BB的CHO细胞系的建立及其生物学特性研究
董荣娜
毋中明
宋丹
张绍敏
李兰英
于德民
1.卫生部激素与教育重点实验室,天津医科大学代谢病医院,3000702.卫生部激素与教育重点实验室,天津医科大学代谢病医院,3000703.卫生部激素与教育重点实验室,天津医科大学代谢病医院,3000704.卫生部激素与教育重点实验室,天津医科大学代谢病医院,3000705.卫生部激素与教育重点实验室,天津医科大学代谢病医院,3000706.卫生部激素与教育重点实验室,天津医科大学代谢病医院,300070
摘要：目的:建立稳定表达人血小板衍化生长因子-BB(PDGF-BB)全长的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系,并检测表达产物的生物活性.方法:通过脂质体瞬间转染的方法将含有rhPDGF-BB全长的质粒转染CHO细胞系.利用抗生素筛选的方法使转染阳性的细胞扩增和单克隆化,进一步稳定传代.通过Western印迹法挑选高表达克隆,进而使用MTT法检测转染前后细胞增殖活性和转染细胞上清培养NIH 313细胞的增殖情况.反复传代、冻存和复苏鉴定表达的稳定性.结果:获得稳定且高效表达rhPDGF-BB的CHO细胞系;转染前后细胞生长速度存在差异,NIH 3T3细胞的增殖随转染细胞上清的浓度和培养时间的增加而增加.结论:pSELECT-GFPzeo-MCS载体能作为稳定表达的载体用于筛选.稳定表达rhPDGF-BB的CHO细胞具有新的生物学功能,实现了组织工程种子细胞的构建,为研究糖尿病溃疡创面愈合的生物材料提供实验基础.
关键词：血小板源性生长因子CHO细胞基因转染皮肤溃疡糖尿病并发症
资助基金：中国博士后科学基金项目(20070410766)天津卫生局科技基金项目(07kz47)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 124-127 )
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