靶向HIF-1α小干扰RNA对裸鼠MiaPaCa2细胞移植瘤生长的影响
陈传贵1
陈剑秋2
孙晋津2
刘庚2
1.天津医科大学附属肿瘤医院食管肿瘤科2.天津医科大学第二医院外科,300211
摘要：目的:初步探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导的靶向缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)小干扰RNA对裸鼠Mia-PaCa2人胰腺癌细胞移植瘤生长的影响.方法:首先构建rAAV介导的以HIF-1α为靶基因的RNA干扰表达载体,即rAAV-siHIF.将rAAV-hrGFP、rAAV-siHIF分别转染对数生长的MiaPaCa2细胞,在乏氧条件下进行培养,应用Real-Time PCR、Western Blot和ELISA法观察其对MiaPaCa2细胞HIF-1α mRNA、蛋白和VEGF表达的影响.将MiaPaCa2细胞接种于裸鼠皮下,形成荷瘤小鼠后随机分别肌注ddH2O(空白对照组)、rAAV-hrGFP(空载病毒组)和rAAV-siHIF(干扰病毒组),30 d后处死荷瘤裸鼠,取出移植瘤并测量肿瘤的大小及肿瘤的质量,应用免疫组化染色观察各组肿瘤标本HIF-1α、VEGF、CD34的表达并计数微血管密度(MVD).结果:体外实验发现,干扰病毒组MiaPaCa2细胞HIF-1α mRNA和蛋白的表达以及VEGF的分泌低于空白对照组(均P<0.01).体内实验发现,干扰病毒组裸鼠移植瘤的生长和HIF-1α、VEGF及CD34的表达也低于空白对照组(P<0.01或P<0.05).而空载病毒组与空白对照组相比,体内外实验结果差别均无统计学意义(均P>0.05).结论:rAAV介导的靶向HIF-1α小干扰RNA有抑制裸鼠MiaPaCa2细胞移植瘤生长的作用,其机制可能是通过抑制移植瘤的血管生成而实现的.
关键词：胰腺肿瘤癌肿瘤细胞培养的肿瘤移植模型动物RNA干扰小鼠裸缺氧诱导因子-1α
资助基金：天津市科技发展计划(05YFSYSF01300)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 295-298 )
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