大肠杆菌偏嗜性人促甲状腺激素β亚基编码DNA序列的克隆及表达
马香书
马彦
孙蓓
王宝利
赵学勤
张镜宇
郭刚
1.卫生部及天津市"激素与发育重点实验室",天津医科大学内分泌研究所,3000702.卫生部及天津市"激素与发育重点实验室",天津医科大学内分泌研究所,3000703.卫生部及天津市"激素与发育重点实验室",天津医科大学内分泌研究所,3000704.卫生部及天津市"激素与发育重点实验室",天津医科大学内分泌研究所,3000705.卫生部及天津市"激素与发育重点实验室",天津医科大学内分泌研究所,3000706.卫生部及天津市"激素与发育重点实验室",天津医科大学内分泌研究所,3000707.卫生部及天津市"激素与发育重点实验室",天津医科大学内分泌研究所,300070
摘要：目的:构建PGEX-3X/大肠杆菌偏嗜性人促甲状腺激素(hTSH)13DNA编码序列原核表达载体,并在E.coliDH5α中进行表达,用于GD(Graves diease)的实验研究.方法:用大肠杆菌偏嗜性密码子替换已知hTSHβ亚基基因编码序列中相应的密码子,按重新设计后的编码序列进行DNA化学合成,然后克隆入表达载体pGEX-3X并进行酶切电泳、测序鉴定,进而在E.coli DH 5α中进行诱导表达.对所表达的GST融合蛋白进行SDS-PAGE、Western blotting及hTSH电化学发光免疫测定.结果:经鉴定,重组质粒pGEX-3X/hTSHβ含有与预期结果一致的435 bp编码hTSHβ链的DNA序列.表达产物为hTSHβ与GST融合蛋白.分子质量约42 ku,于SDS-PAGE中的相应部位可见深染的特异性蛋白条带,可被GST抗体识别并可被抗hTSH抗体检测.结论:实验成功建立了hTSHβ肽链的体外表达系统,为进一步制备hTSHAb及进行GD的研究奠定了基础.
关键词：促甲状腺素大肠杆菌密码子克隆生物基因表达
资助基金："重中之重"学科建设专项基金(05YFGDSF02700)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 340-342 )
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